王菲菲^* , 谷洋洋^* , 周振祥 , 薛北 , 郭宝健 , 吕超 , 许如根^**

扬州大学农业科技发展研究院, 江苏粮食作物现代产业技术协同创新中心, 植物功能基因组学教育部重点实验室, 江苏粮食作物现代产业技术协同创新中心, 扬州, 225009
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《分子植物育种》印刷版, 2022 年, 第 20 卷, 第 11 篇   
收稿日期: 2022年05月15日    接受日期: 2022年05月23日    发表日期: 2023年04月17日

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WRKY 转录因子在植物响应盐碱、干旱、低温等非生物胁迫过程中起到重要作用。实验室前期研究结果发现 HvWRKY62 转录因子响应盐胁迫，然而其分子调控机制尚不清楚。本研究通过 SMART 技术以耐盐大麦品种‘泰兴 9425’为材料构建 cDNA 文库，该酵母文库容量为 1.7×10⁸ CFU/mL，文库插入片段 80%在750 bp 以上，阳性率>90%，符合后续双杂交筛选要求。之后成功构建包括 HvWRKY62 全长、HvWRKY62 N端、HvWRKY62 C 端、WRKY 功能结构域、HvWRKY62 N 端+WRKY 功能结构域、HvWRKY62 C 端+WRKY功能结构域 6 个诱饵表达载体，分别进行自激活活性及毒性检测后，挑选 HvWRKY62 N 端+WRKY 功能结构域载体作为诱饵表达载体进行酵母双杂交筛选，获得 22 个候选互作蛋白的基因序列。通过功能注释发现候选蛋白主要参与碳水化合物代谢、光合作用以及氧化还原等过程。本研究为鉴定 HvWRKY62 的互作蛋白提供了新的线索。

大麦；HvWRKY62；酵母双杂交 cDNA 文库；互作蛋白