研究报告/ Research Report

枸杞ISSR-PCR反应体系优化与遗传多样性研究  

赵孟良1, 3 * , 任钢2 * , 李屹1, 3 , 任鹏鸿1, 3 , 钟启文1, 3 **
1青海大学农林科学院, 西宁, 810016;
2青海省海西州农科所, 海西, 817000;
3青海省蔬菜遗传与生理重点实验室, 西宁, 810016
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16卷, 第 23 篇   
收稿日期: 2017年04月27日    接受日期: 2017年05月08日    发表日期: 2017年06月13日
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摘 要

        为建立枸杞ISSR-PCR反应体系,通过单因子优化试验和L16 (45)正交试验设计对相关参数进行了优化,其最优体系为20 μL含Mg2+ 2.0 mmol/L、dNTPs 0.25 mmol/L、引物0.6 μmol/L、TaqDNA聚合酶0.75 U、模板DNA60 ng。对优化体系进行了稳定性检测,并从100条ISSR引物中筛选出12条,对7份枸杞资源进行了PCR扩增。实验结果表明,12条ISSR引物对7 份枸杞种质资源共扩增出132个条带,其中多态性条带共123条,比率为93.2%;7份枸杞资源遗传距离分布在2.57-8.39,其中长辣椒与黑枸杞遗传关系最远;平均有效等位基因数为1.7156,平均Nei's多样性指数为0.4039,平均Shannon’s指数为0.5888。ISSR标记可用于枸杞遗传多样性研究。

关键词
枸杞;ISSR-PCR;体系优化;引物筛选;遗传多样性
《分子植物育种》印刷版
• 第 16 卷
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