王毅^1,2 , 肖良俊¹ , 马婷¹ , 宁德鲁¹

1云南省林业科学院, 经济林研究所, 云南省木本油料工程技术研究中心, 昆明, 650201; 2云南省林业科学院, 云南省森林植物培育与开发利用重点实验室, 国家林业局云南珍稀濒特森林植物繁育和保护重点实验室, 昆明, 650201
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《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16卷, 第 6 篇   
收稿日期: 2017年04月23日    接受日期: 2017年07月20日    发表日期: 2018年01月31日

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查尔酮合成酶是植物中黄酮类物质生物合成的第一关键酶，在植物抗性生理中扮演重要作用。本研究利用RT-PCR技术从泡核桃中成功克隆获得一个受冷害诱导的查尔酮合成酶基因(JsCHS1)，其基因全长1490 bp，包含1个内含子，开放阅读框全长为1170 bp，编码389个氨基酸，登录号为：KX657834。JSCHS1与核桃查尔酮合成酶蛋白序列同源性高达98%。而泡核桃和核桃查尔酮合成酶基因内含子DNA同源性为95%，核桃CHS内含子与泡核桃相比有8个碱基的缺失。系统进化树分析显示其与核桃形成一个独立分支。半定量PCR显示：泡核桃在常温及低温处理后都有微弱表达，而在低温处理6 h后强烈表达，这说明JsCHS1是典型的受冷害诱导的查尔酮合成酶基因。本研究为揭示泡核桃抗寒机理以及查尔酮合成酶在冷害胁迫下的作用提供研究基础，并为利用基因工程手段培育抗寒新品种提供理论依据。

泡核桃；查尔酮合成酶； 冷害； 基因表达； 基因克隆