李晓微 , 李光辉 , 王南 , 董园园 , 刘秀明 , 姚娜 , 王法微 , 李海燕

吉林农业大学生命科学学院/生物反应器与药物开发教育部工程研究中心, 长春, 130118
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2017 年, 第 15卷, 第 4 篇   
收稿日期: 2018年04月01日    接受日期: 2018年04月14日    发表日期: 2018年01月15日

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亚油酸异构酶可特异性地催化亚油酸转化为活性共轭亚油酸异构体。本研究采用PCR技术从疱疮丙酸杆菌GIM1.243中扩增出亚油酸异构酶基因PAI，片段长1 275 bp。按照目标宿主亚麻芥的密码子偏好性对该基因部分序列进行优化，命名为CaPAI。借助双T-DNA表达载体pSB130，用菜豆种子特异性启动子PhaP替换原有的CaMV35S启动子，驱动CaPAI，终止子替换成菜豆的终止子PhaT；另一个T-DNA保留其原有的表达框，其中含有潮霉素筛选标记基因。通过农杆菌介导的Flora Dip转化法，将构建好的高效植物表达载体pSB130-PhaP-CaPAI-PhaT转入亚麻芥中，抗性筛选和PCR鉴定显示CaPAI基因已整合进亚麻芥基因组中。

共轭亚油酸；亚油酸异构酶基因；亚麻芥；种子特异性；双T-DNA载体