1四川省农业科学院作物研究所, 成都, 610066; 2仲衍种业股份有限公司, 成都, 610066
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16卷, 第 27 篇
收稿日期: 2017年03月24日 接受日期: 2017年04月25日 发表日期: 2018年01月17日
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16卷, 第 27 篇
收稿日期: 2017年03月24日 接受日期: 2017年04月25日 发表日期: 2018年01月17日
© 2018 BioPublisher 生命科学中文期刊出版平台
这是一篇采用Creative Commons Attribution License进行授权的开放取阅论文。只要对本原作有恰当的引用,版权所有人允许和同意第三方无条件的使用与传播。
摘 要
甘蓝型油菜CONSTANS目的基因的克隆以NCBI上公布的序列设计全长扩增引物进行扩增。对目的基因片段测序并进行酶切位点分析,设计酶切引物(BamHⅠ, SacⅠ),通过BamHⅠ和SacⅠ双酶切将目的基因片段连接在真核表达载体pBI121上,PCR鉴定结果表明PBI121+CONSTANS过表达载体已成功构建。将过表达载体转化感受态EHA105细胞,通过拟南芥花絮侵染T0代种子,用含卡拉霉素(50 mg/L)的MS固体培养基进行筛选,获得阳性植株。通过PCR鉴定,结果表明PBI121+CONSTANS过表达载体已成功导入拟南芥中,获得转基因阳性苗12株,为下一步基因功能分析做好了准备。
关键词
甘蓝型油菜;过表达载体;阳性植株