1新疆特殊环境物种保护与调控生物学实验室, 乌鲁木齐, 830054; 2北京师范大学生命科学学院, 抗性基因资源与分子发育北京市重点实验室, 北京, 100875
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2017 年, 第 15卷, 第 20 篇
收稿日期: 2017年03月16日 接受日期: 2017年04月05日 发表日期: 2017年04月28日
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2017 年, 第 15卷, 第 20 篇
收稿日期: 2017年03月16日 接受日期: 2017年04月05日 发表日期: 2017年04月28日
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摘 要
以耐受低温萌发停滞期的种子为实验组,以低温萌发停滞期的种子为对照组,对独行菜(Lepidium apetalum Willd.)种子转录组进行了高通量测序。基于测序数据库资源,本文对独行菜GRAS类转录因子进行了分析,除去冗余,发现独行菜种子共有GRAS家族270个成员。其中138个相对于低温萌发停滞组,在耐受低温萌发的独行菜种子中上调表达,128个下调表达,4个表达水平无差异。进一步选择了一个极显著上调表达的GRAS基因片段,结合同源序列克隆法、采用RT-PCR技术克隆获得该GRAS基因cDNA序列,全长1633bp。通过BLastn同源序列比对分析表明,该全长基因与拟南芥GRAS基因家族SCL18全长基因一致性最高,达到96%,本文将其命名为LaSCL18(GenBank登录号KY466159)。生物信息学分析表明,该cDNA序列编码一个由435个氨基酸组成的开放阅读框、编码蛋白分子质量139.883KD,该蛋白理论等电点为4.97、具有GRAS转录因子家族特有的保守结构域、不具有跨膜区和DNA结合位点,是一个水溶性较好的球状蛋白。实时荧光定量PCR分析表明,独行菜幼苗在低温胁迫处理后LaSCL18基因表达量迅速显著升高,初步推测LaSCL18基因表达与独行菜幼苗耐受低温有关。
关键词
独行菜;GRAS转录因子;LaSCL18;表达分析;低温耐受