1 哈尔滨师范大学生命科学与技术学院, 哈尔滨, 150025
2 白城师范学院生命科学学院, 白城, 137000
3 东北林业大学生命科学学院, 哈尔滨, 150040
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2013 年, 第 11卷, 第 19 篇 doi: 10.3969/mpb.011.000132
收稿日期: 2012年09月06日 接受日期: 2012年09月12日 发表日期: 2012年10月08日
2 白城师范学院生命科学学院, 白城, 137000
3 东北林业大学生命科学学院, 哈尔滨, 150040
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2013 年, 第 11卷, 第 19 篇 doi: 10.3969/mpb.011.000132
收稿日期: 2012年09月06日 接受日期: 2012年09月12日 发表日期: 2012年10月08日
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摘 要
本研究以胡萝卜‘开拓者’无菌苗胚轴诱导的愈伤组织经振荡培养获得悬浮培养细胞为受体材料,以卡那霉素抗性基因为选择标记基因,对农杆菌介导的胡萝卜细胞遗传转化体系进行了优化。结果表明:悬浮细胞预培养1~3 d,胡萝卜细胞与农杆菌细胞比例为1:10或1:100,共培养时间为1~3 d时,转化效率较高;但以悬浮细胞预培养1 d,胡萝卜细胞与农杆菌细胞比例为1:10,共培养时间为1 d时,可得到较多的转化苗。共获得抗性苗290株,经PCR检测66株扩增出特异性条带;部分阳性植株经PCR-Southern检测,初步证明目的基因已转入到胡萝卜中,并收获了转基因胡萝卜。
关键词
胡萝卜;il-4基因;细胞转化;根癌农杆菌