郭超 , 何行健 , 邓力华 , 肖国樱

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《分子植物育种》印刷版, 2017 年, 第 15卷, 第 32 篇   
收稿日期: 2017年02月22日    接受日期: 2017年04月24日    发表日期: 2017年05月09日

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利用hiTAIL-PCR方法研究了转基因水稻BarKasalath-01中外源基因在基因组上的插入位点序列特征，结果获得外源基因T-DNA右边界旁侧序列511 bp，与水稻基因组数据库比对发现，外源基因插入位点位于水稻基因组第8号染色体的第3 326 720处。根据整合位点水稻基因组序列和外源基因T-DNA左边界序列设计引物，扩增得到了左旁侧序列783 bp。基于左右旁侧序列，建立了转基因水稻BarKasalath-01的事件特异性定性PCR检测方法，扩增片段分别为783 bp和411 bp。该方法特异性强、灵敏度高，能够在BarKasalath-01基因组DNA含量为0.1%的模板中检测出转基因成份。依据旁侧序列，还建立了快速鉴定转基因后代植株基因型的3引物PCR检测方法。这些方法的建立，实现了对转基因水稻BarKasalath-01转化事件的特异性检测。

转基因水稻；旁侧序列；事件特异性检测；基因型鉴定