1广西农业科学院, 广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室, 南宁, 530007; 2广西农业科学院, 葡萄与葡萄酒研究所, 南宁, 530007; 3广西农业科学院, 园艺研究所, 南宁, 530007
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2020 年, 第 18卷, 第 101 篇
收稿日期: 2016年11月08日 接受日期: 2016年11月20日 发表日期: 2020年06月24日
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2020 年, 第 18卷, 第 101 篇
收稿日期: 2016年11月08日 接受日期: 2016年11月20日 发表日期: 2020年06月24日
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摘 要
毛葡萄叶片中含有大量多糖、多酚等多种次生代谢物,严重影响 RNA 提取质量,筛选从毛葡萄叶片中提取高质量 RNA 的方法是开展相关分子研究的基础。本研究采用改良 CTAB 法、改良 SDS/酚法和三种试剂盒法,筛选适合转录组测序的提取毛葡萄叶片总 RNA 的方法。结果显示,五种方法均可以获得毛葡萄叶片总 RNA,但在纯度和完整性上差别较大。改良 CTAB 和改良 SDS/酚法提取的总 RNA OD260/OD230 比值小于 1.8,试剂盒 A 法提取的总 RNA 在纯度和完整性上均可以满足转录组测序要求,试剂盒 B 法和试剂盒 C 法提取的总 RNA 降解严重。相比其他四种方法,试剂盒 A 法提取的毛葡萄叶总 RNA 质量更好,在纯度和完整性上均能满足转录组测序及其他分子生物学实验的要求。
关键词
毛葡萄;叶片;RNA提取方法;转录组测序