恃衡 , 华丽 , 科良 , 韡韡 , 刘涛 , 梦珠 , 东明 , 桂信

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《分子植物育种》印刷版, 2017 年, 第 15卷, 第 0 篇   
收稿日期: 1970年01月01日    接受日期: 1970年01月01日

为了研究夜来香生物钟和花香代谢机制，本文以夜来香花瓣为材料，采用RT-PCR和RACE技术相结合，从中获得了夜来香LIS基因的全长cDNA，并命名为CnLIS。生物信息学分析结果表明：该cDNA序列全长为1800 bp，编码560 个氨基酸，其中ORF为1683 bp，5'UTR为56 bp，3'UTR为61 bp；该序列编码的氨基酸序列与软枣猕猴桃（Actinidia arguta）、温州蜜柑（Citrus unshiu）LIS基因的同源性分别为55%、50%，属于类异戊二烯合成C1超级家族（Isoprenoid_Biosyn_C1 superfamily），相对分子量为63844.5，等电点为5.77，该蛋白N端含萜类合成酶结构域——萜类环化酶α-α环化体，C端含天门冬氨酸富集区和Mg²⁺结合位点，亚细胞定位预测该蛋白位于细胞质、叶绿体和微体中。采用实时荧光定量PCR技术，检测花瓣中CnLIS在0时、4时、8时、12时、16时、20时的表达动态，结果表明，CnLIS从夜间0时到中午12时，其表达水平较低，下午16时以后，表达量明显上调，到了晚上20时左右，表达量最大，随后表达量又急剧降低。推测CnLIS可能是夜来香香气形成的一个重要基因，调控萜类物质的合成与释放，参与花香调控过程，其表达量随着花瓣开放与闭合呈节律性变化，该基因的表达可能受生物钟基因所调控。