石河子大学生命科学学院农业生物技术重点实验室, 石河子, 832003
作者
通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2016 年, 第 14卷, 第 15 篇
收稿日期: 2016年05月31日 接受日期: 2016年06月10日 发表日期: 2016年06月15日
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《分子植物育种》印刷版, 2016 年, 第 14卷, 第 15 篇
收稿日期: 2016年05月31日 接受日期: 2016年06月10日 发表日期: 2016年06月15日
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摘 要
为了探究LEC1基因对棉花体细胞胚胎发生的影响,本研究利用地塞米松(DEX)诱导型表达载体pINDEX3,通过农杆菌分别介导大叶落地生根短缺的LEC1(KdLEC1)在新海15号下胚轴以及棉花的两个LEC1基因家族(GbLEC1A,GbLEC1B)和KdLEC1在新陆早33号胚性愈伤组织中的遗传转化,体胚诱导及再生过程,获得KdLEC1,GbLEC1A,GbLEC1B转基因植株。同时以KdLEC1转基因新海15号胚性愈伤组织系为试材,分别进行DEX和无DEX的悬浮诱导处理,实时定量PCR分析KdLEC1的相对表达量。研究表明:经为期13个月的植株再生过程和PCR鉴定,获得了两棵KdLEC1转基因新海15再生植株;分别获得了一棵PCR鉴定正确的KdLEC1,GbLEC1A,GbLEC1B转基因新陆早33再生植株,其再生周期约为10个月。实时定量PCR分析显示,KdLEC1的相对表达量在2.5倍和23倍之间波动,表明pINDEX3可以在不同水平诱导外源基因KdLEC1的表达。本研究旨在为LEC1在棉花体胚发生过程中的功能研究提供良好的材料,从而为棉花种质创新提供理论指导。
关键词
新海15号;新陆早33号;LEC1;体细胞胚胎发生;植株再生