研究报告/Research Report
E8基因与甜蛋白des-pGlu1-Brazzein双价植物表达载体的构建及对人参果的遗传转化 
王克婧1,2,3 
,
张金文1,2,4* 
,
张菲菲1,2,4 ,
乔岩1,2,4 ,
王志伟1,2,4 ,
卢晶1,2,4
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张金文1,2,4* ,
张菲菲1,2,4 ,
乔岩1,2,4 ,
王志伟1,2,4 ,
卢晶1,2,4
1甘肃省作物遗传改良与种质创新重点实验室, 兰州730070;
2甘肃省干旱生境作物学重点实验室, 兰州, 730070;
3甘肃农业大学生命科学技术学院, 兰州, 730070;
4甘肃农业大学农学院, 兰州, 730070
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2016 年, 第 14卷, 第 10 篇
收稿日期: 2016年03月03日 接受日期: 2016年03月07日 发表日期: 2016年03月07日
2甘肃省干旱生境作物学重点实验室, 兰州, 730070;
3甘肃农业大学生命科学技术学院, 兰州, 730070;
4甘肃农业大学农学院, 兰州, 730070
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2016 年, 第 14卷, 第 10 篇
收稿日期: 2016年03月03日 接受日期: 2016年03月07日 发表日期: 2016年03月07日
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摘 要
本研究通过对茄科植物的E8基因的非编码区DNA序列进行亲缘关系及功能元件保守性分析，发现E8基因的非编码区包含ERE，茉莉酸和低温干旱应答等基序并存在较高的保守性，表明利用果实特异性E8启动子改善同属茄科茄属的人参果果实风味更具特异性；利用密码子偏爱性优化设计甜蛋白Brazzein，采用亚克隆技术成功获得甜蛋白des-pGlu1-Brazzein基因和E8启动子基因，经Blast对比均与GenBank中已报道的序列高度同源，并利用2KGQ模型分析des-pGlu1-Brazzein基因的空间结构特性；以中间载体pHANNIBAL及植物表达载体pCEPSP为基础，分别构建由E8启动子及35S启动子驱动的兼具重组甜蛋白及除草剂抗性的植物表达载体，并通过农杆菌介导法进行人参果的遗传转化，获得转化再生植株54株，经检测从中筛选出15株阳性植株，初步确定已经完成目的基因整合到人参果基因组中。
关键词
人参果；des-pGlu1-Brazzein；E8 启动子；CaMV 35S 启动子；植物表达载体；遗传转化
