江苏省中国科学院植物研究所, 南京, 210014
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2016 年, 第 14卷, 第 4 篇
收稿日期: 2016年02月03日 接受日期: 2016年02月18日 发表日期: 2016年04月25日
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2016 年, 第 14卷, 第 4 篇
收稿日期: 2016年02月03日 接受日期: 2016年02月18日 发表日期: 2016年04月25日
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摘 要
水茄果实中富含多糖、蛋白、色素和其他代谢物质,影响其总RNA提取的质量。本研究中比较Trizol法、改良Trizol法、改良CTAB法和两种试剂盒法5种方法提取的水茄果实总RNA,用琼脂糖凝胶电泳检测总RNA的完整性,Onedrop光谱仪检测总RNA的浓度和纯度。结果表明:改良Trizol法最为有效,该方法提取的总RNA在琼脂糖凝胶上得到清晰的28S和18S条带,OD260nm/OD280nm值在1.8~2.1之间、OD260nm/OD230nm的比值大于2.0;改良CTAB法获得的RNA质量较好,但步骤较为繁琐,耗时长;Trizol法和试剂盒法得到总RNA浓度较低。RT-PCR试验进一步表明,以改良Trizol法获得的总RNA可用于基因分离,所得条带清晰,与目的片段大小一致且比对正确。
关键词
水茄;果实;总RNA;提取方法;改良Trizol法