新疆大学生命科学与技术学院, 新疆生物资源基因工程重点实验室, 乌鲁木齐, 830046
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《分子植物育种》印刷版, 2016 年, 第 14卷, 第 1 篇
收稿日期: 2015年12月17日 接受日期: 2016年01月18日 发表日期: 2016年01月11日
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《分子植物育种》印刷版, 2016 年, 第 14卷, 第 1 篇
收稿日期: 2015年12月17日 接受日期: 2016年01月18日 发表日期: 2016年01月11日
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摘 要
沉默基因有助于研究基因在逆境胁迫下的功能。通过对棉花GhBES1基因进行沉默位点的分析,确定GhBES1基因沉默片段为650bp,设计特异性引物,利用PCR克隆从 ‘新陆早17号’ 棉花中获得650 bp的基因片段。经KpnⅠ和XbaⅠ双酶切后与pTRV-RNA2质粒连接构建成重组载体pTRV-GhBES1,转化农杆菌(GV3101)后,侵染干旱胁迫处理的棉花幼苗。结果表明,与pTRV-00相比,携带沉默GhBES1基因的棉花幼苗的脯氨酸和可溶性糖明显降低,分别降低了50.47%和39.51%。丙二醛(MDA)含量增加了 1.84倍。叶绿素a叶绿素b和类胡萝卜素、含水量和甜菜碱也都有一定的下降。研究说明利用VIGS技术沉默GhBES1后,干旱胁迫处理的棉花幼苗的生理生化指标均表现为进一步下降,表明GhBES1可能与棉花抗旱性有密切的相关性。
关键词
棉花;干旱胁迫;VIGS;生理生化检测;基因表达