丝瓜SRAP反应体系的优化  

叶新如 , 朱海生 , 温庆放 , 陈敏氡 , 林碧英
1 福建省农业科学院作物研究所, 福州, 350013; 2 福建省农业科学院蔬菜研究中心, 福州, 350013; 3 福建省蔬菜工程技术研究中心, 福州, 350013; 4 福建农林大学园艺学院, 福州, 350002
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2016 年, 第 14卷, 第 1 篇   
收稿日期: 2015年12月09日    接受日期: 2015年12月30日
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摘 要

以丝瓜基因组DNA为模板,对SRAP反应中主要五个影响因素dNTP浓度、TaqDNA聚合酶浓度、引物浓度、DNA模板浓度、Mg2+浓度进行优化,建立丝瓜SRAP-PCR反应的体系。根据实验确定的最佳反应体系为:25μL SRAP体系为:75ngDNA,0.2 mmol.L-1 dNTP,1.25U Taq酶, 0.16 umol.L-1的单条引物,2.0 mmol.L-1 Mg2+,2.5μL 10×Buffer。最终选用33个丝瓜品种进行所确立扩增体系及扩增程序进行验证,检测结果表现为扩增产物条带清晰明亮、亮度高、重复性好,表明本试验所确定的反应体系及反应程序适用于丝瓜的SRAP分子标记。

关键词
丝瓜;体系优化; SRAP
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《分子植物育种》印刷版
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