研究报告/Research Report
利用番茄果实特异启动子E8改造‘外源基因清除'的表达载体及转化金柑研究 
谢玉明1,2 
,
李益1,2 ,
严佳文1,2 ,
姚润贤1,2 ,
邓子牛1,2 
,
李益1,2 ,
严佳文1,2 ,
姚润贤1,2 ,
邓子牛1,2
1湖南农业大学园艺园林学院, 长沙, 410128;
2国家柑橘改良中心长沙分中心, 长沙, 410128
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2015 年, 第 13卷, 第 16 篇
收稿日期: 2015年05月06日 接受日期: 2015年05月19日 发表日期: 2015年10月15日
2国家柑橘改良中心长沙分中心, 长沙, 410128
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2015 年, 第 13卷, 第 16 篇
收稿日期: 2015年05月06日 接受日期: 2015年05月19日 发表日期: 2015年10月15日
© 2015 BioPublisher 生命科学中文期刊出版平台
这是一篇采用Creative Commons Attribution License进行授权的开放取阅论文。只要对本原作有恰当的引用，版权所有人允许和同意第三方无条件的使用与传播。
摘 要
利用“外源基因清除”技术(‘Gene-Deletor’)，将外源基因从转基因金柑果实中彻底清除，达到用转基因作物生产出非转基因食品的目的。本研究利用引物pE8F和pE8R从樱桃番茄中克隆果实特异启动子E8，通过Sal I和Sma I双酶切置换掉“外源基因清除”载体(pCambia-LF-polseed-FLP, 简称: Y-A)中的花粉、种子特异启动子PAB5，重新构造“外源基因清除”载体Y-A-E8，利用农杆菌EHA105介导转化实生态金柑，获得转化植株，并通过nptⅡ基因特异引物nptⅡ-F和nptⅡ-R PCR检测阳性转化植株。载体Y-A-E8 Sal I和Sma I双酶切结果表明，E8启动子成功替换启动子PAB5，Y-A-E8经EHA105介导转化成功获得11株转化植株且PCR检测到6株为Y-A-E8转基因植株，研究结果可为“外源基因清除”技术在转基因金柑方面的应用提供参考。
关键词
“外源基因清除”技术；果实特异启动子E8；载体改造；金柑；遗传转化
