2 西北农林科技大学 农学院,西安,712100;
3 旱区作物逆境生物学国家重点实验室 西北农林科技大学,西安,712100
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《分子植物育种》印刷版, 2015 年, 第 13卷, 第 25 篇 doi: 10.13271/j.mpb.013.001850
收稿日期: 2015年03月24日 接受日期: 2015年04月25日 发表日期: 2015年06月28日
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Su S., Li R.H., Lang D.Y., Wang J.W., Guo A.G., and Xu H., 2015, Determination of ABA content in wheat leaves with the method of improved SPE-LC-ESI-MS/MS, Fenzi Zhiwu Yuzhong (Molecular Plant Breeding), 13(8): 1850-1856 (苏适, 李瑞航, 郎丹莹, 王军卫, 郭蔼光, 徐虹, 2015, 用改进的SPE-LC-ESI-MS/MS法测定小麦叶片ABA含量, 分子植物育种,13(8): 1850-1856)
为了优化液相色谱-电喷雾串联质谱(LC-ESI-MS/MS)定量分析脱落酸(ABA)的方法,实现快速、准确测定小麦叶片内源ABA含量,本研究建立以超纯水作为溶剂、4℃避光抽提12 h、C18小柱固相萃取(SPE)富集ABA、LC-ESI-MS/MS系统检测、以甲醇/0.2%甲酸水溶液(v/v=4:1)作为LC流动相等度洗脱的定量方法。电喷雾离子源(ESI)采用负离子模式,ABA的质谱(MS)检测应用多反应监测模式(MRM),选择的监测离子对为262.8-152.7。利用ABA标准品检测结果显示:在7.5~60 ng/mL浓度范围内,ABA峰面积与ABA含量线性关系良好,检出限(S/N=3)为4.7 ng/mL。20 ng加标水平的平均回收率达到了98.61%。用该体系测定了小麦返白系及其对照材料矮变1号在常温与低温培养条件下,苗期叶片中内源ABA的含量,结果揭示了两个材料间的差异。本研究结果表明,优化的SPE-LC-ESI-MS/MS体系可以用于小麦叶片中脱落酸的分析,具有样品前处理简便、回收率高、检测灵敏的优点。