张静^1,3 , 张学全^2,3 , 李志英³ , 雷明³ , 徐立³

1华中农业大学植物科学技术学院，湖北武汉，430070；
2海南大学农学院，海口，570228；
3中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所，农业部华南热带作物基因资源与种质创制重点开放实验室，儋州，571737；
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2015 年, 第 13卷, 第 11 篇   doi: 10.13271/j.mpb.013.001276
收稿日期: 2015年01月30日    接受日期: 2015年03月06日    发表日期: 2015年04月07日

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推荐引用：

Zhang J., Zhang X.Q., Li Z.Y., Lei M., and Xu L., 2015, Cloning and overexpression vector construction of AfAP2-1 from aechmeafasciata, Fenzi Zhiwu Yuzhong (Molecular Plant Breeding), 13(6): 1276-1282 (张静，张学全，李志英，雷明，徐立，2015，蜻蜓凤梨AfAP2-1基因的克隆与表达载体构建，分子植物育种，13(6): 1276-1282)

通过对蜻蜓凤梨转录组数据的分析，我们获得一个跟拟南芥AP2同源片段，基于此设计引物，利用RACE技术首次从蜻蜓凤梨中克隆到完整的AfAP2-1序列，其cDNA全长2 185 bp，开放阅读框全长1 404 bp，编码467个氨基酸。保守结构域分析其含有两个AP2结构域，属于AP2亚家族。系统进化树分析发现该蛋白与拟南芥的AP2 RAP2.7亲缘关系较近。通过在CDS序列两端分别引入XbaⅠ和KpnⅠ限制性内切酶酶切位点，我们成功构建了CaMV35S-AfAP2-1-GUS过表达载体。利用农杆菌介导法转化拟南芥植株后，再通过GUS染色和RNA水平鉴定发现CaMV35S-AfAP2-1-GUS已转入拟南芥中并且能正常表达。本研究可为AfAP2-1的功能鉴定奠定基础，对深入研究凤梨科植物开花调控的分子机理具有重要意义。

蜻蜓凤梨；i>AfAP2-1 ；过表达