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《分子植物育种》印刷版, 2022 年, 第 20卷, 第 14 篇
收稿日期: 2021年09月29日 接受日期: 2021年10月11日 发表日期: 2022年07月20日
SnRK2作为脱落酸(abscisic acid, ABA)信号转导途径的关键因子,对应答非生物胁迫防御机制的形成具有重要作用。为验证马铃薯 SnRK2s的功能,本试验以‘青薯 9号’为材料,利用 RT-PCR对 SnRK2家族中的StSRK2E-like 基因进行克隆。序列分析显示,该基因 CDS序列为 1 089 bp,编码蛋白全长为 362 aa,相对分子质量为 41.06 kD,脂溶指数为 89.67,亲水指数为 -0.321,为亲水性蛋白;进化分析显示该基因与番茄中同源基因的亲缘关系最近,相似性高达 98.44%;该基因上游 2 000 bp启动子序列中除了含有 TATA-box和CAAT-box核心元件,还含有干旱相关元件(MBS)及激素响应元件(TCA-element, ABRE, TGA-element),推测该基因参与干旱和激素胁迫应答。用 RT-qPCR定量检测不同干旱胁迫时间下马铃薯根、茎和叶中StSRK2E-like基因表达水平。结果显示:StSRK2E-like 基因在胁迫处理下的表达量显著低于对照,该结果表示该基因对干旱胁迫敏感;且随胁迫时间增加,对照组茎和叶中StSRK2E-like 基因的表达量下调显著,胁迫组叶中下调显著(P<0.05),推测该基因在马铃薯抵御干旱胁迫过程中扮演着重要角色。StSRK2E-like 基因的具体功能需要进一步研究。本试验成功构建 pJAM1502-StSRK2E-like 表达载体,为后续进行StSRK2E-like 基因的功能验证提供试验基础。