晁金泉¹ , 赵一杰² , 吴绍华¹ , 杨署光¹ , 田维敏^1*

1 中国热带农业科学院橡胶研究所, 农业农村部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室, 省部共建国家重点实验室培育基地 - 海南省热带作物栽培生理学重点实验室, 海口, 571101; 2 海南大学热带作物学院, 海口, 570228
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《分子植物育种》印刷版, 2021 年, 第 19卷, 第 15 篇   
收稿日期: 2021年09月16日    接受日期: 2021年09月24日    发表日期: 2022年03月03日

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3- 羟基 -3- 甲基戊二酰辅酶 A 还原酶(HMGR)是调控“碳源”进入类异戊二烯代谢的关键限速酶。天然橡胶是一种类异戊二烯化合物，主要来自于巴西橡胶树(以下简称橡胶树)。割胶是获取天然橡胶的主要方式。在前期研究中，发现了开割树胶乳的橡胶合成效率远高于未开割树。本研究分别构建了未开割树和开割树胶乳的酵母双杂交 cDNA 文库，利用前期制备的 pGBKT7-HbHMGR1 诱饵载体分别对两个文库进行互作蛋白筛选，并对得到的阳性克隆进行回转验证。文库构建结果显示两个酵母文库的库容量均在 1.2×10⁷ CFU 以上，平均插入片段均大于 1.3 kb，质量较高，可用于后续筛库实验。文库筛选结果显示从未开割树胶乳文库中筛选到 3 个候选互作蛋白，其中包含 HbHMGR1 自身(scaffold0419_722144)，推测割胶前 HbHMGR1 可能以二聚体形式存在；在开割树胶乳文库中筛选到 6 个候选互作蛋白，其中包含一个丰度极高的丝氨酸/苏氨酸激酶受体相关蛋白(STRAP, scaffold0891_47224)，表明该蛋白很可能通过与 HbHMGR1 的结合来调控其活性。本研究为深入认识 HbHMGR1 在调控“碳源”在橡胶树割胶前后之间的分配模式提供了参考依据。

巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)；HbHMGR1；酵母双杂交；互作蛋白；荧光定量 PCR