戴雪梅 , 黄天带 , 李季 , 杨先锋 , 黄华孙

中国热带农业科学院橡胶研究所, 农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室, 国家橡胶树育种中心, 儋州, 571737
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2014 年, 第 12卷, 第 29 篇   doi: 10.13271/j.mpb.012.001259
收稿日期: 2014年10月11日    接受日期: 2014年11月01日    发表日期: 2014年11月20日

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推荐引用：

Dai X.M., Huang T.D., Li J., Yang X.F., and Huang H.S., 2014, Effects of Different Explants on Isolation and Regeneration of Protoplast in Rubber Tree, Fenzi Zhiwu Yuzhong (Molecular Plant Breeding), 12(6): 1259-1264 (戴雪梅, 黄天带, 李季, 杨先锋, 黄华孙, 2014, 不同外植体对橡胶树原生质体分离和再生的影响, 分子植物育种, 12(6): 1259-1264)

为了探寻橡胶树原生质体培养再生植株的较佳途径，本研究以橡胶树热研7-33-97花药和内珠被为起始外植体分别诱导愈伤组织，进行悬浮培养建立稳定的胚性悬浮细胞系，并分别对其进行原生质体的分离和培养研究，分析比较不同起始外植体来源原生质体的产量、活力及其在看护培养过程中的分裂生长、体胚发生及植株再生情况。结果显示，在含1.5%纤维素酶、0.15%果胶酶和0.5%离析酶的酶液中酶解处理12 h后，花药和内珠被来源的悬浮细胞原生质体产量分别为7.6×10⁶个/mL PCV和12×10⁶个/mL PCV，平均活力分别为75.2%和83.9%；在看护培养基上这两种来源的原生质体均能发生持续分裂，45 d后从5×10⁵个原生质体形成2 mm以上的小愈伤组织数分别为247个和480个；经体胚诱导培养60 d后获得的体胚数分别为56个和18个，最终花药来源原生质体发育的体胚约有4.7%转化成完整植株，而内珠被来源的原生质体没能得到正常的植株。研究结果表明，经花药培养建立的胚性悬浮细胞系是获得具有植株再生能力原生质体的最佳材料，可为进一步优化橡胶树原生质体培养体系及进行橡胶树品种间体细胞杂交提供依据和参考。

橡胶树；胚性悬浮细胞系；原生质体；体胚发生；植株再生