吴茜^* , 宫颖^* , 邓黄玥 , 江美怡 , 张健 , 韩永华 , 李宗芸 , 刘美艳^**

江苏师范大学生命科学学院, 徐州, 221116
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2022 年, 第 20卷, 第 6 篇   
收稿日期: 2021年04月12日    接受日期: 2021年04月19日    发表日期: 2022年08月01日

这是一篇采用Creative Commons Attribution License进行授权的开放取阅论文。只要对本原作有恰当的引用，版权所有人允许和同意第三方无条件的使用与传播。

几丁质酶能够水解真菌细胞壁，抑制真菌的生长与繁殖，水解产物还能诱导植物的系统抗性，在植物抗病过程中发挥重要的调控作用。本实验室前期从甘薯中克隆了几丁质酶基因 IbChiA 并对其进行了功能验证和表达分析，结果表明黑斑病菌强烈诱导 IbChiA 基因的表达，且在不同抗性甘薯品种中的表达差异显著。在此基础上，本研究在抗感品种中分别克隆了 IbChiA 基因的 2 034 bp 的启动子序列，对比后发现其序列并无差异。PlantCARE 在线分析显示，IbChiA 启动子中包含核心元件 TATA-box 和 CAAT-box，还有响应真菌诱导的作用元件(W-box)以及植物激素等相关的顺式作用元件。将 IbChiA 基因的全长启动子及 7 个启动子 5' 端缺失片段分别替换植物表达载体 pHB 的 2xCaMV 35S 启动子，并在本生烟草叶片中进行瞬时表达。eGFP 的荧光及定量表达分析显示在基因上游 600 bp 及以上都能够正常稳定地发挥启动子的功能，其中在-1 605~1 188 bp 的片段内可能存在增强转录的顺式作用元件。本研究为进一步探索甘薯 IbChiA 基因的调控和表达机制提供了理论依据，并为甘薯抗病基因工程提供了一个理想的候选启动子。

甘薯；IbChiA；启动子；顺式作用元件；功能分析