研究报告
木薯 MeWRKY 12 基因的 CRISPR/Cas9 基因编辑载体的构建及验证 
郭文雅1,2 
,
王海3 ,
王亚杰1,2 ,
张彤1 ,
姚远2 
,
郭建春2 ,
耿梦婷1 ,
陈银华1
,
王海3 ,
王亚杰1,2 ,
张彤1 ,
姚远2 ,
郭建春2 ,
耿梦婷1 ,
陈银华1
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2022 年, 第 20卷, 第 18 篇
收稿日期: 2021年03月18日 接受日期: 2021年04月03日 发表日期: 2022年09月15日
© 2022 BioPublisher 生命科学中文期刊出版平台
这是一篇采用Creative Commons Attribution License进行授权的开放取阅论文。只要对本原作有恰当的引用，版权所有人允许和同意第三方无条件的使用与传播。
摘 要
植物 WRKY转录因子可参与植物对重金属离子的胁迫响应过程，木薯 MeWRKY 12 基因表达受到镉(Cd)、铅(Pb)离子胁迫诱导。本研究利用在线软件 CRISPR-P v2.0 设计了 MeWRKY 12 基因的编辑靶点，构建 CRISPR/Cas9 基因编辑载体 pCAMBIA1301-Cas9-MeWRKY 12-sgRNA，并将该载体转化、侵染木薯脆性胚性愈伤组织。PCR 扩增基因靶点及潜在的脱靶位点区域序列，并进行 Sanger 测序分析序列变化情况。结果表明，MeWRKY 12 基因被成功编辑，且没有脱靶现象。本研究有助于进一步获得 MeWRKY 12 基因突变体，为解析 MeWRKY 12 转录因子调控木薯响应 Cd、Pb 胁迫的分子机理打下基础。
关键词
CRISPR/Cas9；木薯；MeWRKY 12 基因
