刘娜 , 倪志勇 , 朱燕飞 , 陈全家 , 曲延英

新疆农业大学农学院, 新疆农业大学农业生物技术重点实验室, 乌鲁木齐, 830052
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2015 年, 第 13卷, 第 8 篇   doi: 10.13271/j.mpb.013.000541
收稿日期: 2014年08月18日    接受日期: 2014年10月09日    发表日期: 2014年11月04日

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液泡膜H⁺-ATPase在植物应对非生物胁迫中起着十分重要的作用，对其关键亚基基因的克隆及分析，有助于阐释V-ATPase在逆境下的调节及响应机制。本研究利用RT-PCR技术从棉花中克隆了一个液泡膜H⁺-ATPase亚基A基因，命名为GhVHA-A。该基因ORF为1 872 bp，编码623个氨基酸，预测的蛋白质理论分子量为68.41 kD，等电点为5.17。通过氨基酸序列比对和系统进化树分析发现，GhVHA-A与可可V-ATPase A亚基的同源性最高，达到97.9%，在进化上亲缘关系较近；且在编码蛋白的氨基酸序列上有两个与ATP或GTP的磷酸基团相互作用的保守结构域“GAFGCGKT”和“PSVNWLISYS”，说明A亚基是相对保守的。本研究构建了植物表达载体pCAMBIA 1304-VHA-A，并转入到根癌农杆菌(GV3101)中，为后续研究棉花V-ATPase A亚基基因在干旱胁迫应答中的功能奠定试验基础。 

棉花；V-ATPase；克隆；植物表达载体