1青海大学,西宁, 810016; 2青海省农林科学院,西宁, 810016; 3青海省农林科学院,青海省马铃薯育种重点实验室,西宁, 810016; 4青海大学,青藏高原生物技术教育部重点实验室,西宁, 810016; 5青海大学,省部共建三江源生态与高原农牧业国家重点实验室,西宁, 810016
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2021 年, 第 19卷, 第 5 篇
收稿日期: 2020年11月17日 接受日期: 2020年11月20日 发表日期: 2021年04月19日
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2021 年, 第 19卷, 第 5 篇
收稿日期: 2020年11月17日 接受日期: 2020年11月20日 发表日期: 2021年04月19日
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摘 要
DNA甲基化对植物的生长发育至关重要,DNA甲基转移酶建立和维持着DNA甲基化,其中结构域重排甲基转移酶DRM2催化非对称位点的从头甲基化。为了初步探究马铃薯StDRM2基因的功能,本研究利用同源克隆基因技术从马铃薯‘青薯9号’中克隆了StDRM2基因,利用Gateway技术构建过表达载体,农杆菌遗传转化马铃薯‘大西洋’,获得5株转基因马铃薯苗。利用qRT-PCR技术测定StDRM2基因在转基因马铃薯及其不同组织(根, 茎, 叶)中的表达量。结果表明,StDRM2基因CDS序列全长1 812 bp,编码603个蛋白质氨基酸。系统发育进化树分析表明,StDRM2与茄科作物的番茄亲缘关系最近;qRT-PCR表明转基因马铃薯中的StDRM2基因表达量显著上调,最高相对表达量是野生型马铃薯的6.77倍。StDRM2基因在转基因马铃薯根、茎、叶中均有表达,其表达量不同且有显著性差异(P<0.05),其中根中的表达量最高,茎中的表达量最低。本研究中转基因马铃薯的获得为研究StDRM2功能提供试验材料,组织表达模式分析为进一步了解StDRM2基因功能和作用机制提供理论依据。
关键词
马铃薯;StDRM2 基因;载体构建;遗传转化;表达量分析