张利东^1* , 朱骞^1* , 董陈文华¹ , 张树林¹ , 伍腾飞¹ , 熊海波¹ , 张小玲¹ , 吕永刚³ , 吴超¹ , 李伟¹ , 陈丽娟^1,2 , 李东宣^1,2

1 云南农业大学稻作研究所, 昆明, 650201;
2 云南省高校滇型杂交粳稻分子育种重点实验室, 昆明, 650201;
3 云南省农业科学院, 昆明, 650205
*同等贡献作者
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2015 年, 第 13卷, 第 3 篇   doi: 10.13271/j.mpb.013.000032
收稿日期: 2014年06月18日    接受日期: 2014年07月24日    发表日期: 2014年08月23日

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高活性启动子在基因时空表达调控方面有着重要的作用，利用高效率启动子调控抗性目的基因特异性表达，不仅可以提高作物抗胁迫能力，而且对改良品种方面具有重要的意义。迄今为止，有关水稻翻译起始因子GOS2基因(eukaryotic translation initiation factor 1b)启动子pGOS2启动效率鉴定的报道还很有限，尤其是与CaMV35S双拷贝启动子的启动效率评估的研究还未见报道。本研究旨在利用PCR和生物信息学等技术，分离及解析水稻GOS2启动子特性，构建pGOS2::GUS双元表达载体，使用农杆菌介导法转化水稻胚性愈伤组织并获得转基因水稻植株，并通过PCR检测与GUS组织化学分析，评估pGOS2在转基因水稻叶片组织中的效率。生物信息学分析结果表明：所克隆的GOS2启动子，序列全长为3 155 bp，具有真核生物典型的一些顺式元件，如TATA-box、AGA-motif、CAAT-box以及GCGC-repeat等；GOS2启动子核心序列位于-43 bp~+4 bp区，得分是0.97。GUS组织化学分析结果显示：阴性对照组未发现GUS信号，而转基因实验组则表现为不同程度的GUS活性，pGOS2启动效率远远高于单双拷贝的CaMV35S启动子。本研究结果证实了GOS2启动子在水稻叶片组织中的活性远远地高于加强型CaMV35S启动子，为今后水稻分子育种及相关启动子的开发与筛选提供了一种可行的方法和新的视野。 

水稻(Oryza sativa L.)；GOS2；启动子；克隆；GUS组织化学分析