李玉洁¹ , 山本義治² , 曹后男¹ , 金美玉¹ , 赵成日^1,2*

1延边大学农学院,延吉, 133002; 2岐阜大学,应用生物科学部,岐阜, 5011193,日本
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2022 年, 第 20卷, 第 18 篇   
收稿日期: 2020年08月28日    接受日期: 2020年09月17日    发表日期: 2022年12月09日

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用Promega公司pNL1.1[Nluc]载体的Nluc′基因替换yy621质粒中的LUC基因，构建yy630质粒。用PCR扩增的方法从pNL1.1[Nluc]载体中得到带有Bgl II和Xba I限制性酶切位点的Nluc′基因片段，经Bgl II和Xba I消化后的片段插入到质粒yy621的Bgl II和Xba I酶切位点之间，替换原有的LUC基因。经菌落筛选、PCR鉴定和测序验证，阳性菌落中的Nluc′基因序列与质粒pNL1.1[Nluc]中的Nluc基因序列完全一致，质粒630构建成功。比较分析并筛选出适合植物体研究的荧光素酶载体对于研究植物基因调控机理有着重要的意义。

荧光素酶；yy630载体；构建