新疆农业大学农学院, 农业生物技术重点实验室, 乌鲁木齐, 830052
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2022 年, 第 20卷, 第 17 篇
收稿日期: 2020年08月11日 接受日期: 2020年08月26日 发表日期: 2022年09月15日
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2022 年, 第 20卷, 第 17 篇
收稿日期: 2020年08月11日 接受日期: 2020年08月26日 发表日期: 2022年09月15日
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摘 要
功能性 U6 启动子广泛应用于 CRISPR 系统中,其特性的鉴定有助于相关生物的基因组编辑。为筛选高效的玉米 U6 启动子,本实验以玉米自交系 B73 为材料,采用同源克隆的方法克隆到 3 个 ZmU6 启动子,利用 Transfer PCR 方法分别对 3 个启动子进行截短,并以 GUS 作为报告基因,构建相应的截短启动子驱动 GUS 融合表达载体,通过浸花法转化拟南芥。结果表明,经过两轮 PCR,获得了 3 种玉米 U6 启动子,其长度分别为 1 114、1 119 和 1 165 bp,启动子序列比对发现 3 种启动子均含有比较保守的 USE 元件和 TATA box。GUS 组织化学染色结果表明,克隆到 3 个截短的 ZmU6 启动子可以驱动 GUS 在转基因拟南芥中的表达,研究结果为玉米功能基因组学研究提供参考。
关键词
玉米(Zea mays);U6 启动子;克隆;功能鉴定