1 吉林农业大学农学院, 长春, 130118; 2 北京市农林科学院玉米研究中心, 玉米 DNA 指纹及分子育种北京市重点实验室, 北京, 100097; 3 全国农业技术推广服务中心, 北京, 100125; 4 吉林省种子管理总站, 长春, 130062
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2022 年, 第 20卷, 第 24 篇
收稿日期: 2020年07月28日 接受日期: 2020年08月06日 发表日期: 2022年08月03日
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2022 年, 第 20卷, 第 24 篇
收稿日期: 2020年07月28日 接受日期: 2020年08月06日 发表日期: 2022年08月03日
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摘 要
近几年,随着中国玉米品种数量的激增,对制种基地玉米种子纯度质量检测提出了新的挑战。为更快、更准确地鉴定玉米种子纯度中的自交苗和异型株,本研究采用 9 对优异 SSR 引物,建立了快速 PCR程序,可在 28 min 内完成 PCR 扩增。采用 TaKaRa Multiplex PCR assay kit 体系,基于快速 PCR 和多重PCR,建立了快速 9 重 PCR 体系,结合碱裂解 DNA 提取法和荧光毛细管电泳,1 h 30 min 内可完成 SSR 纯度鉴定基因分型全流程。采用快速 9 重 PCR 体系对一份 96 粒‘郑单 958’检测样品进行纯度鉴定,共检测出 93个正常个体,2 个自交个体,1 个异型株,鉴定结果与常规 PCR 结果完全一致。该快速 PCR 体系扩增结果稳定、重复性强、节约成本、峰型易判断,能大大提高检测工作效率,对种子纯度鉴定、品种真实性检测以及SSR 基因型检测有较高应用价值及前景。
关键词
玉米;种子纯度;多重 PCR;快速 PCR