1湖南农业大学苎麻研究所, 长沙, 410128; 2 湖南农业大学, 湖南省种质资源创新与资源利用重点实验室, 长沙, 410128
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2022 年, 第 20卷, 第 12 篇
收稿日期: 2020年07月01日 接受日期: 2020年07月16日 发表日期: 2022年04月28日
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2022 年, 第 20卷, 第 12 篇
收稿日期: 2020年07月01日 接受日期: 2020年07月16日 发表日期: 2022年04月28日
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摘 要
ACC 氧化酶(ACC oxidase, ACO)是乙烯合成途径中的一个关键酶。本研究通过 RT-PCR 结合RACE 技术克隆得到一个 ACO 基因,命名为 BnACO2,该基因 cDNA 序列全长为 1 377 bp,开放阅读框为957 bp,编码 318 个氨基酸多肽,预测其分子量和等电点(pI)分别为 36.145 kD 和 5.60。生物信息学分析表明,BnACO2 编码蛋白没有信号肽和跨膜结构域,亚细胞定位于细胞质。与川桑等物种 ACC 氧化酶基因核苷酸
序列同源性在 83%以上,氨基酸序列同源性在 87%以上。通过系统发育树发现该基因和山黄麻、大麻 ACO 基因亲缘关系最近。实时荧光定量 PCR 分析表明,苎麻 BnACO2 基因在苎麻各部位均有表达,特别是在雌花花芽中表达显著。最后成功构建原核表达载体 pQE-BnACO2,诱导表达出的目的蛋白分子量大小约为 36.15 kD,与预测的蛋白大小一致。这为进一步研究 BnACO2 基因的功能提供了科学依据。
关键词
苎麻;ACC 氧化酶;克隆;表达分析