秦惠珍 , 杨秀德 , 唐健民 , 邹蓉 , 朱成豪 , 韦霄 , 蒋运生 , 熊忠臣 , 唐凤鸾

广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所, 广西喀斯特植物保育与恢复生态学重点实验室, 桂林, 541006
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2022 年, 第 20卷, 第 28 篇   
收稿日期: 2020年06月17日    接受日期: 2020年07月02日    发表日期: 2022年08月25日

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为筛出适用于极小种群野生植物十万大山苏铁的SSR引物和ISSR引物，建立十万大山苏铁的SSR-PCR和ISSR-PCR反应体系，本研究以十万大山苏铁为试验材料，用改良CTAB法提取其基因组DNA，采用L₁₆(4³)正交设计方法，探索2×Taq Mix、引物浓度和模板DNA含量3个指标参数对十万大山苏铁SSR-PCR和ISSR-PCR反应体系的影响。建立了相关优化体系：20 μL的SSR-PCR扩增体系中2×Taq Mix 10 μL、引物0.4 μmol/L、模板DNA 25 ng；20 μL的ISSR-PCR扩增体系中含2×Taq Mix 10 μL、引物0.5 μmol/L、模板DNA 60 ng。结果表明，建立的反应体系及筛选出来的15对SSR引物和9条ISSR引物通过了21份十万大山苏铁样品验证，反应体系稳定可靠。

十万大山苏铁(Cycas shiwandashanica)；反应体系；ISSR-PCR；SSR-PCR；引物筛选