1东北林业大学,林木遗传育种国家重点实验室,哈尔滨, 150040; 2河北雾灵山国家级自然保护区管理中心,兴隆, 067300
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2021 年, 第 19卷, 第 20 篇
收稿日期: 2020年06月16日 接受日期: 2020年06月26日 发表日期: 2022年01月17日
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2021 年, 第 19卷, 第 20 篇
收稿日期: 2020年06月16日 接受日期: 2020年06月26日 发表日期: 2022年01月17日
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摘 要
分析白桦BpERF1.1 基因不同组织部位以及低温胁迫后的表达模式,定位基因表达部位,并为获得转基因白桦做初步准备。通过实时荧光定量 PRC技术测定BpERF1.1 基因的相对表达量;利用基因枪法在洋葱表皮细胞瞬时表达 35S::BpERF1.1-GFP,激光共聚焦显微镜观察 GFP发光情况,获得BpERF1.1 基因表达产物的亚细胞定位信息;此外,利用双酶切法将BpERF1.1 基因连接到 pRokⅡ过表达载体,以及热激法转化到大肠杆菌感受态细胞中。BpERF1.1 基因在叶片中相对表达量最高;低温胁迫后的 24 h内,白桦BpERF1.1 基因持续上调表达;BpERF1.1 基因的表达产物定位在细胞核;pRokⅡ-BpERF1.1 植物过表达载体菌液 PCR的目的条带位置正确,测序结果 BLAST比对后与序列吻合。白桦BpERF1.1 基因主要表达部位在叶片,其可以响应低温逆境,且过表达载体 pRokⅡ-BpERF1.1 构建成功。
关键词
白桦;BpERF1.1;低温胁迫