湖南农业大学生物科学技术学院,长沙, 410128
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2021 年, 第 19卷, 第 19 篇
收稿日期: 2020年05月15日 接受日期: 2020年05月22日 发表日期: 2021年12月12日
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2021 年, 第 19卷, 第 19 篇
收稿日期: 2020年05月15日 接受日期: 2020年05月22日 发表日期: 2021年12月12日
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摘 要
为研究青蒿素合成的关键酶基因AaADS 过表达对黄花蒿腺毛发育和青蒿素含量的影响,本研究根据 GenBank收录的黄花蒿AaADS 基因启动子和 cDNA序列设计引物,采用同源克隆的方法从黄花蒿品种(428-A)中扩增出AaADS 基因启动子和 cDNA序列。构建GUS 报告载体AaADSpro::GUS 和植物表达载体AaADSpro::AaADS,利用农杆菌介导的叶盘转化法转化黄花蒿。通过对转基因植株叶片腺毛的GUS 基因活性检测和不同组织器官AaADS 基因 RT-PCR半定量分析,以及过表达AaADS 基因的植株叶片下表皮腺毛荧光显微观察、统计和植株青蒿素含量的测定,结果表明:AaADS 基因能在黄花蒿腺毛细胞中高效表达;转基因植株中AaADS 基因表达量明显高于对照,且在叶片组织表达量最高;转基因植株叶片腺毛细胞较对照植株明显增大,过表达AaADS 基因植株中青蒿素含量达 27.3 mg/g DW,比对照植株中青蒿素含量 12 mg/g DW提高了 2.3倍。本研究说明AaADS 基因过表达能有效促进黄花蒿腺毛细胞的生长和青蒿素的生物合成,为选育高青蒿素含量的黄花蒿新品系提供可行性方法。
关键词
黄花蒿;青蒿素;AaADS;腺毛