孔静静^* , 陆许可^* , 赵小洁 , 阴祖军 , 王帅 , 王德龙 , 王俊娟 , 樊伟丽 , 张德超 , 张天豹 , 叶武威

中国农业科学院棉花研究所, 棉花生物学国家重点实验室, 安阳, 455000
*同等贡献作者
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2015 年, 第 13卷, 第 9 篇   doi: 10.13271/j.mpb.013.000301
收稿日期: 2014年04月25日    接受日期: 2014年07月24日    发表日期: 2014年08月31日

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根据NCBI核酸数据库中杜氏盐藻耐盐基因甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因(dunaliella salina glycerald- ehyde-3-phosphate dehydrogenase, DsGAPDH)的cDNA全长序列信息，本研究利用RT-PCR技术扩增克隆该基因，获得完整全长为1 131 bp并编码376个氨基酸的多肽的ORF序列。生物信息学分析表明：DsGAPDH编码的蛋白与拟南芥、蒺藜苜蓿、玉米和葡萄等物种高度同源，分别达到90%、92%、96%和97%。构建的系统发育树结果显示，该基因编码的蛋白与团藻中该蛋白的亲缘关系最为接近。该蛋白主要由四种二级结构即α-螺旋、β-折叠、转角和无规则卷曲等组成。构建pBI121-DsGAPDH植物表达载体，以非抗虫棉F12A、F12B和HU-749513为材料，利用基因枪活体技术转化棉花花粉，并对T₀代种子进行分子检测和相关序列验证，成功获得两株阳性转基因植株，为基因枪活体转化技术研究奠定了一定的实践基础，同时也为棉花耐盐机制的研究提供了新材料。

杜氏盐藻；甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因；陆地棉；转化；分子检测