毛建才 , 李俊华 , 王豪杰 , 闫淼 , 翟文强^*

新疆农业科学院哈密瓜研究中心,乌鲁木齐, 830091
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2021 年, 第 19卷, 第 31 篇   
收稿日期: 2020年05月11日    接受日期: 2020年05月15日    发表日期: 2021年12月12日

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获得甜瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f. sp.melonis)具有再生功能的原生质体，是构建其高效遗传转化体系的重要途径之一。本研究采用单因素分析法分析了甜瓜枯萎病菌菌丝摇培时间、裂解酶浓度、酶解时间和温度、渗透压稳定剂的种类和浓度及 pH对原生质体释放的影响，并对再生培养基种类和培养基琼脂浓度等再生条件进行优化，建立了高效制备甜瓜枯萎病菌原生质体的稳定体系。结果表明，将分生孢子培养 18 h后收集菌丝体，以 1.2 mol/L的 KCl作为稳定剂，在 pH 6.0的条件下，加入 10 mg/mL的裂解酶，32℃酶解 4 h，获得的原生质体产量最高，在琼脂浓度为 0.5% (W/V)的 SR固体培养基中进行原生质体再生，再生率最高，可达 26.32%。本研究结果为甜瓜枯萎病菌的分子生物学研究和抗病育种提供技术支持。

甜瓜枯萎病菌；原生质体；优化