宁波市农业科学研究院蔬菜研究所, 宁波市瓜菜育种重点实验室, 宁波, 31504
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《分子植物育种》印刷版, 2015 年, 第 13卷, 第 21 篇 doi: 10.13271/j.mpb.013.000401
收稿日期: 2014年04月18日 接受日期: 2014年08月25日 发表日期: 2014年12月03日
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《分子植物育种》印刷版, 2015 年, 第 13卷, 第 21 篇 doi: 10.13271/j.mpb.013.000401
收稿日期: 2014年04月18日 接受日期: 2014年08月25日 发表日期: 2014年12月03日
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摘 要
为利用瓠瓜砧木根系提取DNA进行品种真实性分子检测,本研究比较了CTAB法(方法1)、SDS简易法(方法2)、SDS法(方法3)、TPS法(方法4)、快速制备法(方法5)和简易快速制备法(方法6)提取瓠瓜类型砧木根系基因组DNA的效果。研究结果表明,SDS简易法(方法2)提取瓠瓜根系总DNA质量好,蛋白污染小,PCR扩增条带清晰稳定,满足瓠瓜根系DNA分子检测的要求。利用该法提取的‘甬砧1号’、‘甬砧3号’、‘甬砧4号’、‘甬砧5号’、‘神通力’和‘京欣砧1号’的根系DNA可重复上述6份瓠瓜材料幼叶DNA的指纹图谱结果(01001, 10010, 10101, 01010, 00110和00000)。新增加‘华欣948’、‘5756’、‘1715’和‘56YZ2’等4份瓠瓜砧木材料,通过根系DNA构建的指纹图谱分别是00110、01011、11000和01000。10份瓠瓜类型砧木品种根系DNA指纹图谱出现概率为1/13 500,图谱出现概率低,表明可以利用根系取代叶片提取DNA,用于构建指纹图谱进行品种鉴定与保护。
关键词
瓠瓜;根系;DNA制备;指纹图谱