燕丽萍 , 王因花 , 吴德军^* , 任飞 , 李庆华 , 姚俊修^*

山东省林业科学研究院, 山东省林木遗传改良重点实验室, 济南, 250014
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2021 年, 第 19卷, 第 24 篇   
收稿日期: 2020年02月07日    接受日期: 2020年02月14日    发表日期: 2021年05月11日

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本研究采用改良的 CTAB 法提取元宝枫基因组 DNA，并使用 L₁₆(4⁵)正交试验设计。通过 5 因素 4水平实验，筛选 Taq DNA 聚合酶、dNTPs、引物浓度、Mg²⁺、模板 DNA 浓度及其用量，建立并优化元宝枫(Acer truncatum)的最佳 SSR-PCR 反应体系，即总体积 20 μL，Taq DNA 聚合酶、dNTPs、引物、Mg²⁺ 和模板 DNA 浓度分别为 1 U/20 μL、0.2 mmol/L、0.6 mmol/L、1.25 mmol/L 和 75 ng/20 μL。扩增实验结果表明，该反应体系稳定性较好，可重复性高，具有较好的分辨率。可从 59 对引物中筛选出 14 对适用于元宝枫并具有较明显的多态性的 SSR 引物，为进一步研究元宝枫的分子标记辅助育种、SSR 遗传多样性分析和遗传图谱构建提供了良好的基础。

 

元宝枫；正交设计；引物筛选