邵征绩¹ , 张璐¹ , 郑升¹ , 陈小军¹ , 刘华华¹ , 邝曦¹ , 龙治坚^1,3* , 韩国辉^2*

1西南科技大学生命科学与工程学院,绵阳, 621010; 2重庆市农业科学院果树研究所,重庆, 401329; 3西南科技大学,竹类研究所,绵阳, 621010
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《分子植物育种》印刷版, 2021 年, 第 19卷, 第 26 篇   
收稿日期: 2020年01月14日    接受日期: 2020年01月17日    发表日期: 2021年04月14日

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为建立铁皮石斛的 SCoT-PCR反应体系，本研究以 8个不同增殖代的铁皮石斛组培苗为试验材料，采用正交试验设计，对影响 PCR反应体系的 2×Taq Master Mix混合液、引物、模板 DNA的浓度进行优化，建立了铁皮石斛 SCoT-PCR的最佳反应体系，筛选引物，并对 1~8代的组培苗进行遗传稳定性鉴定。结果表明：铁皮石斛的 SCoT-PCR最佳反应体系(20 μL)包含2×Taq Master Mix 10 μL、引物 0.50 μmol/L、模板DNA 40 ng；从 60条引物中筛选出 19条扩增结果稳定、条带清晰的 SCoT引物；所有引物在 8个增殖代的16份供试材料中均能扩增出清晰、丰富而稳定的条带，但是所得条带的数量和大小一致，均没有多态性，即16份材料没有发生遗传变异。反应体系的建立可为铁皮石斛种质资源鉴定和遗传多样性研究提供参考，也为其他药用植物组培苗遗传稳定研究提供理论和方法借鉴。

铁皮石斛(Dendrobium candidum Kimura et Migo)；SCoT标记；组培苗；遗传稳定性