赵成金¹ , 林艳虹¹ , 瞿绍洪² , 杨秀芬¹ , 曾洪梅¹ , 邱德文¹ , 郭立华¹

1 中国农业科学院植物保护研究所, 植物病虫害生物学国家重点实验室, 北京, 100081;
2 浙江省农业科学院, 病毒学与生物技术研究所, 杭州, 310021
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2014 年, 第 12卷, 第 2 篇   doi: 10.13271/j.mpb.012.000853
收稿日期: 2014年02月24日    接受日期: 2014年03月22日    发表日期: 2014年07月07日

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推荐引用：

Zhao C.J., Lin Y.H., Qu S.H., Yang X.F., Zeng H.M., Qiu D.W., and Guo L.H., 2014, Construction of Trivalent RNA Silencing Expression Vectors and Cultivation of Transgenic Rices with Resistance to Rice Black-Streaked Dwarf Virus, Fenzi Zhiwu Yuzhong (Molecular Plant Breeding), 12(5): 843-852 (赵成金, 林艳虹, 瞿绍洪, 杨秀芬, 曾洪梅, 邱德文, 郭立华, 2014, 抗水稻黑条矮缩病毒三价RNAi表达载体的构建及转基因水稻的培育, 分子植物育种, 12(5): 853-858)

 

水稻黑条矮缩病毒(Rice black-streaked dwarf virus, RBSDV)不同双链RNA片段的三价RNAi (RNA interference)表达载体在转基因水稻中的研究尚未见报道。本研究以RBSDV已报道不同双链RNA序列为基础，设计了针对S2、S6、S10三个基因共605 bp的RNAi靶序列，通过基因合成的方法获得相应的目的片段。利用Gateway® LR Clonase^TM Ⅱ Enzyme Mix的LR反应将目的基因构建到RNAi载体pBDL03中，然后通过农杆菌转化法转到水稻品种泰粳394中。通过PCR和荧光验证共获得45株阳性苗。T1代植株RBSDV抗性鉴定结果证实针对S2、S6和S10基因的三价RNA沉默载体对RBSDV具有良好的抗性。本研究结果为利用RNAi技术进行植物抗病毒研究奠定了基础。

RBSDV； RNA干扰；转基因水稻；gateway技术