1 海南大学热带作物学院, 海南省热带生物资源可持续利用重点实验室, 海口, 570228; 2 海南出入境检验检疫局, 热带植物隔离检疫中心, 海口,570311
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2020 年, 第 18卷, 第 6 篇
收稿日期: 2019年12月02日 接受日期: 2019年12月11日 发表日期: 2020年08月21日
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2020 年, 第 18卷, 第 6 篇
收稿日期: 2019年12月02日 接受日期: 2019年12月11日 发表日期: 2020年08月21日
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摘 要
为了解文心兰生物钟基因 OnELF3 的转录调控,本研究采用 TAIL-PCR 技术从文心兰基因组中克隆到 OnELF3 基因起始密码子上游 2 204 bp 的启动子序列。使用 BDGP、PlantCARE 和 PLACE 在线软件对OnELF3 基因启动子的转录起始位点与顺式作用元件进行预测。结果表明启动子序列除包含 TATA-box 和CAAT-box 等启动子基本元件外,还包含组织特异性元件、光调控元件、植物激素响应元件、胁迫反应响应元件和昼夜节律调控元件等。为探究 OnELF3 启动子的表达活性,构建 pCAMBIA1301-pOnELF3p: GUS 载体,利用农杆菌介导法,转化烟草与拟南芥。烟草叶片瞬时转化表明克隆的 OnELF3 启动子序列具有启动子活性。转化拟南芥结果表明,OnELF3 启动子能够驱动下游的 GUS 基因在 T2 代拟南芥中稳定表达,GUS 组织染色显示该启动子呈现发育与组织特异性表达。这些结果为进一步研究文心兰 OnELF3 基因的转录表达调控与相关功能分析提供基础。
关键词
文心兰(Oncidium hybridum);OnELF3;启动子分析;GUS 染色