黄幸 ¹ , 丁峰^2* , 潘介春^1* , 张树伟³ , 徐炯志¹ , 王金英¹ , 李琳¹ , 王颖¹ , 李浩然¹ , 刘一¹

1 广西大学农学院, 南宁, 530004; 2 广西壮族自治区农业科学院, 广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室, 南宁, 530004; 3 广西壮族自治区农业科学院园艺研究所, 南宁, 530007
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《分子植物育种》印刷版, 2021 年, 第 19卷, 第 18 篇   
收稿日期: 2019年10月31日    接受日期: 2019年11月07日    发表日期: 2021年01月26日

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以龙眼成熟叶片为材料，利用实验室构建的龙眼转录组数据库，筛选出 DlWRKY57 基因 cDNA 序列，对其开放阅读框(ORF)进行克隆和生物信息学分析。结果表明，DlWRKY 57 基因 ORF 长度为 894 bp，编码297 个氨基酸，此蛋白属于 WRKY 基因家族中的Ⅱa 类，存在 1 个 WRKY 结合位点。通过生物信息学分析表明，该蛋白属于非跨膜亲水蛋白，预测定位于细胞核，存在 45 个氨基酸磷酸化位点。其二级结构由无规则卷曲、α- 螺旋和延伸链构成，其中无规则卷曲为二级结构中最主要的结构元件，并且二级结构与三级结构预测结果高度一致。同源基因进化树分析表明该基因与木薯亲缘关系最近。以 pMD18-T 和 pBI121 载体为基础，成功构建了植物超表达载体 pBI121-DlWRKY57，利用农杆菌花序法转化拟南芥，经 PCR 分子检测，获得含DlWRKY57 基因的拟南芥植株，该超表达载体的遗传转化为 DlWRKY57 基因功能的深入研究提供依据。

龙眼(Dimocarpus longan)；DlWRKY57；基因克隆；超表达载体构建