朱成豪^1,2 , 韦记青² , 韦记青^2* , 高丽梅² , 邹蓉² , 秦惠珍²

1 桂林医学院药学院, 桂林, 541004; 2 广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所, 桂林, 541006
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《分子植物育种》印刷版, 2020 年, 第 18卷, 第 26 篇   
收稿日期: 2019年10月21日    接受日期: 2019年10月24日    发表日期: 2020年12月11日

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为建立与优化广西药食两用植物鳞尾木的 ISSR-PCR 反应体系和扩增程序，本研究采用正交和单因素试验设计方法，对影响鳞尾木 ISSR-PCR 反应体系的 dNTPs、Taq DNA 聚合酶、引物、模板 DNA 及 Mg2+浓度 5 个因素进行了优化试验，建立了稳定的、可重复的鳞尾木 ISSR-PCR 扩增反应体系。结果显示：在 20 滋L的反应体系中，dNTPs 浓度为 0.4 mmol/L、Taq DNA 聚合酶用量为 1.5 U、引物浓度为 0.8 滋mol/L、Mg2+ 浓度为 2.0 mmol/L、模板 DNA 浓度为 45 ng。扩增程序为：在 94℃条件下预变性 5 min；94℃条件下变性 30 s，52.9℃条件下退火 30 s，72℃条件下延伸 30 s，以上 3 个步骤循环 40 次，最后 72℃延伸 10 min。这一优化体系的建立可为深入开展鳞尾木种质资源遗传多样性的研究提供帮助。
 

鳞尾木(Champereia manillana)；ISSR-PCR 反应体系；正交试验