伟怀 , Gbokie Jr. Thomas , 梁艳琼 , 黄兴 , 郑金龙 , 习金根 , 陆英 , 贺春萍 , 易克贤

1 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所, 农业农村部热带作物有害生物综合治理重点实验室, 海南省热带农业有害生物监测与控制重点实验室,海口, 571101; 2南京农业大学植物保护学院,南京, 210095
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《分子植物育种》印刷版, 2020 年, 第 18卷, 第 27 篇   
收稿日期: 2019年09月06日    接受日期: 2019年10月09日    发表日期: 2020年06月22日

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为了明确调查中发现在咖啡苗圃以及咖啡幼树中出现的一种疑似咖啡褐斑病的病原菌以及发生条 件，本研究通过采集咖啡病叶，按照柯赫氏法则进行分离，同时利用引物 ITS1/ITS4 及 H3F/R 对病原菌进行 分子鉴定，最后利用平板培养法测定不同温度、光照和 pH对菌丝体生长的影响。最终共分离获得 5个分离 物，其菌落特征、分生孢子梗及分生孢子形态无明显差异，形态特征与尾孢相一致。 5个菌株均能对中粒种咖 啡致病，再分离获得的菌株其菌落形态、分生孢子梗及分生孢子特征均符合尾孢特征。 ITS及组蛋白 H3基因 序列分子鉴定结果表明， ITS树不能鉴别 5个菌株的分类地位，尤其 CF13的分类地位。而基于 H3 基因序列 构建的系统发育树中， 5个待鉴定菌株与 11株咖啡生尾孢菌 C. coffeicola聚为一支。结合分离物形态特征， 将其鉴定为咖啡生尾孢菌(C. coffeicola)。培养特性测定结果表明：该菌生长的温度范围为 13℃~35℃，最适温 度为 25℃~28℃；菌丝体生长的 pH值为 3~11，最适 pH值为 6~7；光照条件对菌丝体生长的影响不明显。

咖啡生尾孢；咖啡褐斑病；分离鉴定；培养特性