张丽^1,2 , 郭佩瑶^1,2 , 张春华³ , 王美军¹ , 邓斯颖^1,2 , 陈己任^1,2 , 于晓英^1,2*

1湖南农业大学园艺学院,长沙, 410128; 2湖南省中亚热带优质花木繁育与利用工程技术中心,长沙, 410128; 3长沙民政职业技术学院,长沙,410004
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《分子植物育种》印刷版, 2020 年, 第 18卷, 第 16 篇   
收稿日期: 2019年08月27日    接受日期: 2019年09月06日    发表日期: 2020年10月30日

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为了建立稳定、高效的瓜叶菊遗传转化体系，本试验以瓜叶菊无菌苗茎段作为外植体，采用农杆菌EHA105介导法转化eGFP 基因。探讨了不同菌液浓度，共培养时间，硫酸卡那霉素(Kan)和特美汀(Tim)浓度，乙酰丁香酮(AS)和表面活性剂 Silwet L-77浓度，以及浸泡时间、超声波和真空渗入处理对外植体生长与转化率的影响。结果表明：在瓜叶菊叶片中成功检测到eGFP 基因的瞬时表达，农杆菌菌液OD₆₀₀为 1.0，共培养 3 d时最有利于农杆菌与外植体的融合生长；40 mg/L Kan和 200 mg/L Tim可以分别作为有效的外植体筛选压和抑菌浓度；100 μmol/L AS和 0.03% Silwet L-77能有效地诱导愈伤组织和提高转化率；浸泡 30 min、超声波 60 s和真空渗入 30 s都能促进愈伤组织的形成及提高转化率。
 

农杆菌；eGFP 基因；遗传转化；瓜叶菊