研究报告
木薯EIL基因克隆和蛋白诱导表达及纯化 
谢燕伟 
,
曾鸿秋 * 
,
曾鸿秋 *
海南大学热带作物学院, 海南省热带生物资源可持续利用重点实验室, 海口, 570228
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2020 年, 第 18卷, 第 8 篇
收稿日期: 2019年08月26日 接受日期: 2019年08月30日 发表日期: 2020年02月17日
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2020 年, 第 18卷, 第 8 篇
收稿日期: 2019年08月26日 接受日期: 2019年08月30日 发表日期: 2020年02月17日
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摘 要
ETHYLENE INSENSITIVE3-LIKE (EIL)基因家族是乙烯信号通道重要的正调控因子，在乙烯信号传递过程中启动抗病相关基因表达参与植物免疫应答提高植物的抗性。为了研究 EIL 基因编码蛋白与下游靶基因特异性结合传递乙烯信号，是否参与木薯抗逆境胁迫的调控，本研究从木薯中克隆一个 EIL 同源基因，命名为 MeEIL 。分析MeEIL 启动子所包含的各种功能元件，结果显示该启动子中含有 G-box、W box 和MYC 等元件。对 MeEIL 基因的 ORF 分析结果表明该基因编码含 621 个氨基酸残基的蛋白质。使用同源重组的方法将 MeEIL 的 CDS 序列连接到蛋白表达载体 pET32a 上。SDS-PAGE 检测表明在 28℃和 16℃都可成功诱导蛋白表达，且 28℃诱导效果更佳，通过大量诱导蛋白表达并用 His 标签纯化试剂盒纯化，Westernblot 分析验证 MeEIL 蛋白被成功的诱导出来。
关键词
木薯(Manihot esculenta Crantz）；MeEIL；启动子；蛋白诱导
