张璠¹ , 蔡明亮¹ , 黄小贞^1,2* , 赵德刚^1,3*

1贵州大学生命科学学院,山地植物资源保护与种质创新省部共建教育部重点实验室,贵阳, 550025; 2贵州大学茶学院,贵阳, 550025; 3贵州省农业科学研究院,国家农业农村部 DUS中心贵阳分中心,贵阳, 550006
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《分子植物育种》印刷版, 2020 年, 第 18卷, 第 13 篇   
收稿日期: 2019年08月10日    接受日期: 2019年08月19日    发表日期: 2020年10月30日

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环境低温严重影响水稻(Oryza sativa L.)的产量和品质。本实验室前期研究发现，与真核细胞膜鞘磷脂代谢相关的长链基激酶 LCBKs (Long chain base kinases)和植物的冷适应密切相关。为了进一步解析 LCBKs激酶在水稻中的生物学作用，本研究利用基因组定点编辑技术 CRISPR/Cas9，构建了水稻OsLCBK1 和OsLCBK2 的单基因和双基因编辑载体。通过农杆菌 EHA105介导的愈伤转化法侵染粳稻‘中花 11’，抗性筛选获得阳性植株。结合测序分析发现，T₀代的转基因植株靶标位点发生了多种类型的突变，包括纯合、杂合和双等位等。本研究成功实现了OsLCBK1 和OsLCBK2 的单基因及双基因定点编辑，获得了多种突变类型的水稻长链基激酶单突变体oslcbk1、oslcbk2 以及双突变体oslcbk1&oslcbk2。这些突变体为揭示水稻 OsLCBKs响应低温应答以及参与其他生物学过程提供了研究材料。
 

水稻(Oryza sativa L.)；长链基激酶；CRISPR/Cas9；基因敲除