曾妍静^1,2 , 沈文涛² , 庹德财² , 黎小瑛² , 言普² , 高新征³ , 周鹏^1,2

1 海南大学热带作物学院, 海口, 570228; 2 中国热带农业科学院热带生物技术研究所, 海南热带农业资源研究院, 海口, 571101; 3 海南医学院基础医学与生命科学学院, 海口, 571199
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《分子植物育种》印刷版, 2019 年, 第 17卷, 第 19 篇   
收稿日期: 2019年06月25日    接受日期: 2019年06月27日    发表日期: 2020年02月12日

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Nimble Cloning 是一项新型的分子克隆技术，具有操作简单、使用灵活、克隆效率高、标准化克隆等优点，但 Nimble Cloning 需要使用配套的表达载体。本研究将 pDOE 系列的 4 个整合型 BiFC 载体上的 SfiI位点去除，然后在这 4 个载体的多克隆位点处插入 NC 克隆框，构建了一套适用于 Nimble Cloning 的新型植物 BiFC 表达载体，命名为 pNC-BiFC-VD 系列载体。将 pNC-BiFC-VD 载体应用到植物蛋白互作研究中，分析了番木瓜 eIFiso4E 和病毒 PRSV 的 vpg 蛋白之间的互作，结果表明番木瓜 eIFiso4E 和 PRSV-vpg 在细胞核发生互作。该套新型植物 BiFC 表达载体有望在植物蛋白互作研究中得到广泛应用。

分子克隆；Nimble Cloning；双分子荧光互补(BiFC)；蛋白互作