研究报告

植物瞬时表达体系真空侵染法的优化  

王悦 , 吴艳菊 , 孟大伟 , 郎晨婧 , 赖薪宇 , 刘佳 , 葛禹凡 , 杨丽萍*
吉林师范大学生命科学学院, 吉林省植物资源科学与绿色生产重点实验室, 四平, 136000
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2020 年, 第 18卷, 第 21 篇   
收稿日期: 2019年06月18日    接受日期: 2019年06月21日    发表日期: 2020年11月04日
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摘 要

病毒能够激活宿主的防御途径,诱导宿主大量基因表达。辅助成分 - 蛋白酶(helper-componentprotease, HC-Pro)是 RNA 病毒编码的基因沉默抑制子,关于 HC-Pro 诱导植物内源基因表达的分子机制并不十分清楚。本研究利用农杆菌介导的真空侵染法在拟南芥(Arabidopsis thaliana)小苗中瞬时表达了外源基因HC-Pro,并对影响基因表达效率的真空侵染条件进行了优化。结果表明农杆菌重悬液浓度 OD600=1.5,真空压力为 0.08 MPaHC-Pro 基因表达效率最高(95%)。半定量 RT-PCR 检测结果表明在真空侵染 14 d 后,HC-Pro在拟南芥(Arabidopsis thaliana)中得到了瞬时表达。通过优化了农杆菌介导的真空侵染法,外源基因快速、高效在拟南芥中得到了表达。本研究结果为研究病毒抑制子 HC-Pro 的功能提供了帮助。 

关键词
拟南芥(Arabidopsis thaliana);小苗真空侵染;农杆菌(Agrobacterium)
《分子植物育种》印刷版
• 第 18 卷
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