技术主题/Technology Feature

不同方法提取的小麦籽粒蛋白双向电泳凝胶分离效果的分析比较  

王慧娜1 , 高建华3 , 张淑英2 , 高庆荣1 , 张卫东1 , 李骞骞1 , 姜晓丽1
1 山东农业大学, 作物生物学国家重点实验室, 泰安, 271018;
2 德州市农业局种子管理处, 德州, 253016;
3 山东临沂烟草有限公司沂南分公司, 临沂, 276000
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2014 年, 第 12卷, 第 22 篇   doi: 10.13271/j.mpb.012.000788
收稿日期: 2013年12月18日    接受日期: 2014年02月06日    发表日期: 2014年03月04日
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推荐引用:

Wang H.N., Gao J.H., Zhang S.Y., Gao Q.R., Zhang W.D., Li Q.Q., and Jiang X.L., 2014, Analysis and comparison of two-dimensional electrophoresis gel separation of wheat grain protein extracted by different methods, Fenzi Zhiwu Yuzhong (Molecular Plant Breeding), 12(4): 788-795 (王慧娜, 高建华, 张淑英, 高庆荣, 张卫东, 李骞骞, 姜晓丽, 2014, 不同方法提取的小麦籽粒蛋白双向电泳凝胶分离效果的分析比较, 分子植物育种, 12(4): 788-795)

摘 要

为探索适于小麦籽粒蛋白质组学研究的样品制备最优方法,本研究以Rht10鲁麦15开花后第31天的籽粒为材料,采用4种不同蛋白质提取方法:TCA/丙酮法、尿素/硫脲法、酚提取法Ⅰ和酚提取法Ⅱ,对不同提取方法得到的蛋白量以及蛋白分离结果进行比较分析。结果显示:TCA/丙酮法和尿素/硫脲法获得的蛋白点较少,分别为484个和489个,蛋白质损失较大,蛋白质在碱性端(pH 7附近)堆积严重;酚提取方法Ⅰ得到的蛋白点709个,部分蛋白点弥散,碱性端蛋白轻微堆积;酚提取方法Ⅱ得到的蛋白点866个,蛋白点清晰,无碱性蛋白堆积。研究结果表明,在小麦籽粒蛋白质组的研究中,酚提取方法更为适合小麦籽粒蛋白的提取,同时方法Ⅱ优于方法。

关键词
小麦;籽粒蛋白;蛋白提取;双向电泳
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《分子植物育种》印刷版
• 第 12 卷
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