魏环宇^1,2 , 邓小鹏³ , 晋艳³ , 蔺忠龙⁴ , 郑元仙 ⁵ , 何元胜 ⁵ , 陈小龙 ⁶ , 魏薇¹ , 黄飞燕¹ , 余磊 ^1* , 童文杰 ^3*

1 昆明学院农学院, 云南省都市特色农业工程技术研究中心, 昆明, 650214; 2 云南农业大学植物保护学院, 昆明, 650201; 3 云南省烟草农业科学研究院, 昆明, 650201; 4 中国烟草总公司云南省公司, 昆明, 650011; 5 云南省烟草公司临沧市公司, 临沧, 677000; 6 河南中烟工业有限责任公司, 郑州, 450000
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《分子植物育种》印刷版, 2020 年, 第 18卷, 第 9 篇   
收稿日期: 2019年04月25日    接受日期: 2019年04月30日    发表日期: 2020年06月05日

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通过同源克隆法获得烟草抗病基因同源序列(RGAs)，为烟草抗病基因的筛选和相关研究提供帮助。基于抗病基因的 NBS-LRR 保守结构域，筛选并合成了 3 对简并引物，扩增烟草中的 NBS-LRR 类抗病基因。获得了 4 条与抗病基因具有高度同源性的 NBS-LRR 类烟草抗病基因同源序列(TRGA, 登录号: MK634316, MK634317, MK634318, MK634319)，目的片段大小均在 500 bp 左右；BLAST X 分析表明，获得的 4 个烟草RGAs 与已知 RGAs 具有高度相似性，氨基酸相似性为 97%~100%；聚类分析将其分成 2 大类，包括 TIRNBS-LRR 和 non-TIR-NBS-LRR 两类抗病基因，其编码氨基酸序列含有 NBS 保守区的典型特征基序。通过简并引物进行同源扩增是分离烟草 RGAs 的有效方法，可为进一步抗病基因筛选及抗病分子育种奠定基础。
 

烟草(Nicotiana tabacum L.)；NBS-LRR；抗病基因同源序列